پایگاه علمی سعید سان دانلود رایگان مقالات علمی کنفرانس و ژورنال
چکیده پایان نامه
اطلاع از مسیرهای متابولیسم دارو نقش مهمی در درک سمیت دارو دارد. این اطلاعات می توانند در طراحی داروهای جدید و روشن کردن مکانیسم سرطان زایی ترکیبات شیمیایی به کار روند. از
این رو یافتن روشی مناسب برای بررسی متابولیسم داروها گام مهمی در جهت رسیدن به دیگر اطلاعات با ارزش در مورد داروها است. متابولیسم نوسکاپین در ادرار انسان، خرگوش و موش صحرایی بررسی شده است. طبق نتایج به دست آمده از این مطالعات نوسکاپین از دو مسیر o- دمتیلاسیون و شکسته شدن پیوند C1-9 متابولیزه می شود و مکونین به عنوان محصول عمده متابولیسم آن شناخته شده است. در این تحقیق متابولیسم نوسکاپین توسط یک روش ex vivo، سلولهای جدا شده کبدی، مورد بررسی قرار گرفت این روش از چند جنبه دارای اهمیت است: این روش حد واسط مناسبی بین روشهای قبلی مانند آنزیم های حل شده، فراکسیون ارگان جدا شده و مطالعه مستقیم روی حیوان کامل است. این سلولها خصوصیات لازم بافت دست نخورده مانند نفوذپذیری غشا را دارا هستند از این رو در بسیاری از مطالعات بیوشیمیایی به کار می روند.
در این تحقیق سلولهای کبد موش صحرایی طی یک فرآیند دقیق جدا شدند و زنده بودن آنها با آزمایش منع تریپان آبی %1/0 و مشاهده میکروسکوپی سلولها تأیید شد. شناسایی استاندارد داروی نوسکاپین و متابولیت اصلی آن، مکونین توسط روش HPLC صورت گرفت. اگر چه استانداردهای نوسکاپین و متابولیت اصلی آن در محلولهای Spike شده مشاهده شدند اما این روش قادر به شناسایی متابولیت ها در عصاره سلولی نبود. به نظر می رسد که افزایش حساسیت روش به مشاهده همزمان نوسکاپین و متابولیت ها کمک کند.
مقدمه:
متابولیسم یکی از مراحل مهم فارکوکینتیک داروها است. مطالعه در مورد متابولیسم داروها برای دستیابی به اطلاعاتی در مورد سمیت داروها و مکانیسم اثر آنها مفید است. روش های مختلفی برای بررسی متابولیسم وجود دارند که عبارتند از: خوراندن ترکیبات به حیوانات در حالت عادی یا با کانول در راههای صفراوی و مطالعه و جستجوی متابولیت های دارو در مایعات بیولوژیک مانند خون، ادرار، و … ، مطالعات آنزیمی بر روی برشهای بافتی، هموژنه ها و اجزای سلولی. مطالعه روی حیوان دارای مشکلاتی است بنابراین در این مطالعه از سوسپانسیون سلولهای جدا شده کبدی استفاده شده است. این روش علاوه بر بررسی متابولیسم در سایر مطالعات بیوشیمیایی از جمله مطالعه روی گلوکونئوژنز، گلیکولیز، سنتز پروتئین، لیپید، اسیدهای چرب و اوره، انتقالات غشاء و … نیز می تواند مورد استفاده قرار گیرد.
1-1- اوپیوییدها
1-1-1- تاریخچه
کلمه اوپیویید برای همه مشتقات طبیعی و نیمه صناعی آلکالوییدی تریاک، داروهای مشابه صناعی و شبه اوپیوییدی که فعالیت آنها با آنتاگونیست اوپیوییدی، نالوکسان مهار می شود و همچنین چندین پپتید درون زاد که با چندین زیر گونه از گیرنده های اوپیویید تعامل می کنند، استفاده می شود.
این مواد سالهاست به عنوان ضددرد، نشاط آور و ضد اسهال کاربرد دارند. اوپیوییدها از تریاک استخراج می شوند. تریاک ترشحات خشک شده کپسول نارس گیاه خشخاش با نام علمی Papaver somniferum است و آلکالوییدهای زیادی دارد که مسئول اثرات فارماکولوژیک آن هستند. مورفین یکی از آنها است. شواهدی در دست است که از حدود 6000 سال قبل در مصر باستان، یونان و روم قدیم از گیاه خشخاش استفاده شده است. این گیاه دارای دو محصول اصلی است، دانه های خشخاش که بدون مورفین و دارای روغن قابل مصرف اندو دیگری تریاک که دارای شهرت خطرناک و رعب آور است. دانه های خشخاش بعد از رسیدن دارای هیچ ماده خطرناکی نیستند و قابل خوردن یا مصارف دیگر هستند (1و2).
در سال 1803 داروشناس آلمانی سرتورنور (Serturner) با جدا ساختن یک ماده قلیایی فعال خالص از تریاک، فارماکولوژی مدرن این داروها را پایه گذاری نمود. در تاریخ داروسازی، این اولین باری بود که از یک ماده طبیعی مشتقی با قدرت اثر استاندارد جدا می شد. سرتورنور با الهام از نام الهه رویاهای یونانی Morpheus نام مورفین را به این ترکیب جدید داد. استخراج صنعتی مورفین برای اولین بار در سال 1928 با دستگاههایی که توسط فردی به نام جانوس کابای Janos kabay تکامل یافته بود، عمل شد (2و3).
چکیده پایان نامه
بخش اول: مقدمه
مقدمه……………………………………………………………………………………………………….
1-1- اوپیوییدها………………………………………………………………………………………….
1-1-1- تاریخچه………………………………………………………………………………………..
1-1-2- آلکالوییدهای تریاک………………………………………………………………………….
1-1-3- پپتیدهای اوپیویید درون زاد…………………………………………………………………
1-1-4- آثار اوپیوییدها بر اعضای مختلف…………………………………………………………
1-1-5- مصارف بالینی اوپیوییدها……………………………………………………………………
1-2- متابولیسم…………………………………………………………………………………………..
1-2-1- تاریخچه………………………………………………………………………………………..
1-2-2- کلیات متابولیسم………………………………………………………………………………
1-2-3- مکان های متابولیسم داروها………………………………………………………………..
1-2-4- عوامل تعیین کننده سرعت تغییر شکل زیستی………………………………………….
1-2-5- تکنیک های تجربی بررسی متابولیسم…………………………………………………….
1-2-6- کاربرد و اهمیت بررسی متابولیسم…………………………………………………………
1-3- جداسازی سلولهای کبد…………………………………………………………………………
1-4- روش های مطالعه شده برای شناسایی و اندازه گیری نوسکاپین و متابولیت هایش…
1-5- کلیاتی درباره کروماتوگرافی و HPLC……………………………………………………….
1-5-1- تاریخچه………………………………………………………………………………………..
1-5-2- اساس کروماتوگرافی…………………………………………………………………………
1-5-3- فازهای متحرک و ساکن در کروماتوگرافی مایع………………………………………..
1-5-4- کروماتوگرافی مایع با کارآیی بالا………………………………………………………….
1-5-5- اساس دستگاه HPLC……………………………………………………………………….
عنوان صفحه
1-6- نوسکاپین…………………………………………………………………………………………..
1-6-1- برخی اثرات نوسکاپین………………………………………………………………………
1-6-2- فارماکوکینتیک نوسکاپین……………………………………………………………………
1-6-3- مروری بر روند متابولیسم نوسکاپین………………………………………………………
بخش دوم: روشها و مواد
2-1- اهداف مطالعه……………………………………………………………………………………..
2-2- دستگاه ها و وسایل ……………………………………………………………………………..
2-3- مواد…………………………………………………………………………………………………
2-4- تهیه بافرهای پرفیوژن……………………………………………………………………………
2-4-1- محلول Stock بافر هنکس با غلظت 10 برابر…………………………………………..
2-4-2- محلول Stock بافر کربس- هنزلیت با غلظت 2 برابر………………………………….
2-4-3- بافر هنکس یک……………………………………………………………………………….
2-4-4- بافر هنکس دو………………………………………………………………………………..
2-4-5- بافر کربس آلبومین……………………………………………………………………………
2-4-6- بافر کربس- هپس…………………………………………………………………………….
2-5- تهیه محلول کلاژن و کوت کردن پلیت 6خانه………………………………………………
2-6- محیط کشت……………………………………………………………………………………….
2-6-1- مراحل تهیه محیط کشت: (1:1) DMEM, F12………………………………………….
2-7- سرم جنین گاو (FBS)…………………………………………………………………………..
2-8- کیت استریل پرفیوژن……………………………………………………………………………
2-9- تهیه هپاتوسیت های تازه………………………………………………………………………..
2-9-1- نگهداری سلولهای به دست آمده از کبد موش………………………………………….
2-9-2- بررسی حیات سلولی و نحوه اثر دادن دارو روی سلولهای جدا شده از کبد موش………
2-9-3- تهیه نمونه برای انجام آنالیز…………………………………………………………………
2-10- روش سنتز مکونین (6 و 7- دی متوکسی فتالید)………………………………………..
2-11- دلایل انتخاب HPLC………………………………………………………………………….
عنوان صفحه
2-11-1- مشخصات دستگاه HPLC………………………………………………………………..
2-11-2- انواع روش های HPLC آزمایش شده………………………………………………….
2-11-3- روش تهیه بافر 10X استات با 4 pH=…………………………………………………..
2-11-4- روش تهیه بافر فسفات سدیم Mm 25 با 5/4 pH=…………………………………
2-12- استخراج متابولیت از ادرار انسان…………………………………………………………….
بخش سوم: نتایج
3-1- جداسازی سلولهای کبد…………………………………………………………………………
3-2- سنتز مکونین………………………………………………………………………………………
3-3- روش کروماتوگرافی با کارکرد عالی (HPLC)……………………………………………..
بخش چهارم: بحث و نتیجه گیری
4-1- جداسازی سلول های کبد موش………………………………………………………………
4-2- روش کروماتوگرافی با کارکرد عالی (HPLC)……………………………………………..
4-3- متابولیسم نوسکاپین……………………………………………………………………………..
4-4- متابولیسم نوسکاپین در ادرار انسان…………………………………………………………..
خلاصه انگلیسی………………………………………………………………………………………….
منابع…………………………………………………………………………………………………………
اختصارات
این فایل ورد در 75 صفحه به خدمتتون ارئه میشود.